Macchia di Gram: come è fatta ea cosa serve

Contenuto

• Come viene eseguita la colorazione di Gram
• Cosa serve

La colorazione di Gram, o semplicemente Gram, è una tecnica rapida e semplice che mira a differenziare i batteri in base alle caratteristiche della loro parete cellulare dopo l'esposizione a diversi coloranti e soluzioni.

Quindi, mediante colorazione di Gram, è possibile controllare, oltre alla forma dei batteri, il colore che acquisiscono, e questo risultato è importante per definire altre strategie di identificazione della specie batterica e per il medico indicare un trattamento preventivo secondo le caratteristiche osservate al microscopio.

La colorazione di Gram viene solitamente eseguita di routine in laboratorio e fa parte dell'esame batterioscopico. Comprendi cos'è la batterioscopia e come viene eseguita.

Come viene eseguita la colorazione di Gram

La colorazione di Gram è un metodo veloce, pratico ed economico per identificare i batteri responsabili delle infezioni, essendo utile ai medici per indicare un trattamento preventivo per l'infezione che può verificarsi, poiché sono note le caratteristiche specifiche di questi gruppi di batteri,

La colorazione di Gram viene eseguita in 7 fasi principali, tuttavia il protocollo può variare a seconda del laboratorio:

1. Porre sul vetrino alcune colonie del batterio, aggiungendo una goccia d'acqua per facilitare l'omogeneizzazione delle colonie;
2. Lasciar asciugare un po ', e la lama può passare velocemente attraverso la fiamma per favorire l'asciugatura, tuttavia è importante prestare attenzione alla temperatura, poiché se la temperatura è troppo alta è possibile che ci sia un cambiamento nella struttura del batteri, che possono interferire con il risultato dell'esame;
3. Quando il vetrino è asciutto, coprire con il colorante viola crystal e lasciare agire per circa 1 minuto;
4. Lavare il vetrino con un getto di acqua corrente e coprire il vetrino con il lugol, che ha l'obiettivo di fissare il colorante blu, e lasciarlo agire per 1 minuto. Entrambi i tipi di batteri possono assorbire il complesso formato dal colorante e dal lugol, diventando blu;
5. Quindi, lavare il vetrino con acqua corrente e applicare alcol al 95%, lasciandolo agire per 30 secondi. L'alcol è responsabile della dissoluzione della membrana lipidica che forma i batteri gram-negativi e, quindi, della rimozione del complesso formato tra il colorante e il lugol, scolorendo questi batteri. Tuttavia, nel caso dei batteri gram-positivi, l'alcol disidrata la parete cellulare dei batteri gram-positivi, provocando la contrazione dei pori e rendendoli impermeabili;
6. Quindi, lavare nuovamente in acqua corrente e coprire il vetrino con il secondo colorante, fuchsin o safranin e lasciarlo agire per 30 secondi;
7. Quindi, lavare il vetrino sotto l'acqua corrente e lasciarlo asciugare a temperatura ambiente.

Non appena il vetrino è asciutto, è possibile mettere una goccia di olio da immersione e osservare il vetrino al microscopio con un obiettivo 100x, potendo verificare la presenza o l'assenza di batteri, nonché la presenza di lieviti ed epiteliali cellule.

Cosa serve

La colorazione di Gram ha l'obiettivo principale di differenziare i batteri in base alle caratteristiche della parete cellulare e alla morfologia generale. Pertanto, in base alle caratteristiche osservate al microscopio, i batteri possono essere classificati in:

• Batteri Gram-positivi, che vengono visualizzati con un colore blu per il fatto che non sono scoloriti dall'alcol, poiché hanno una parete cellulare più spessa ei loro pori si restringono quando esposti al lugol;
• Batteri Gram-negativi, che vengono visualizzati con un colore rosa / viola a causa del fatto che sono scoloriti dall'alcol e macchiati da safranina o fucsina.

Dopo aver visionato i batteri al microscopio, è possibile che vengano effettuati ulteriori test in laboratorio per identificare le specie di batteri. Tuttavia, attraverso il Gram e l'associazione con segni e sintomi presentati dalla persona, il medico può indicare un trattamento preventivo fino a quando non sarà disponibile il risultato di esami più specifici, in quanto in questo modo è possibile diminuire il tasso di replicazione batterica e prevenire complicazioni.